利福昔明杂质对照品全攻略：EP八杂质逐一解析+一致性评价备货清单

一、利福昔明：肠道选择性抗菌药，为何杂质控制格外复杂

利福昔明（Rifaximin）是利福霉素SV的半合成衍生物，于1988年在意大利首次获批上市，商品名Xifaxan（昔服申）。其核心药理特征是口服几乎不经肠道吸收（吸收率<0.4%），在肠腔局部发挥广谱抗菌作用，通过不可逆结合细菌DNA依赖性RNA聚合酶β亚基来抑制细菌RNA合成。目前主要适应症包括旅行者腹泻、腹泻型肠易激综合征（IBS-D）及肝性脑病（HE）。

利福昔明 Rifaximin

CAS No.:80621-81-4

国内方面，利福昔明片已有多家企业持有老批文，但截至2026年，尚无仿制药通过一致性评价，仿制药市场占比不足1%，原研产品仍占主导。随着市场持续增长（近5年增速约26%），加之晶型壁垒（α晶型是上市制剂的关键形态）逐步被关注，预计后续将有更多仿制企业推进一致性评价研究。

利福昔明的杂质控制难度高于一般化学合成药，原因在于其通过微生物发酵-半合成联合工艺制备，利福霉素O等发酵中间体结构复杂，合成步骤带入的工艺杂质、结构相似的异构体及多种降解途径，共同构成了一个庞大而复杂的杂质谱，对对照品配套要求极高。

二、利福昔明的杂质来源分类

理解利福昔明的杂质来源，有助于研究人员准确选择所需对照品类型：

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• 工艺杂质：来源于合成路线中使用的起始原料（如利福霉素S）、中间体及副反应产物。这类杂质结构上与利福昔明主体相似，分子量通常在750–810 Da区间，是EP药典重点受控的品种。

• 降解杂质：利福昔明对碱性和氧化条件敏感，在强制降解研究中，碱性条件下降解程度最为显著，氧化降解次之。代表性降解杂质包括两种氧化降解物，均已有文献报道结构鉴定数据。

• 起始原料相关杂质：利福霉素S（Rifamycin S）是利福昔明合成的关键起始原料，同时也是欧洲药典收载的EP杂质E，在原料药质量研究中具有双重意义。

• 代谢/ADME相关化合物：利福昔明口服吸收极低，系统性代谢量有限。N-氧化物（利福昔明亚胺-N-氧化物，CAS 51963-55-4）是已有报道的代谢相关化合物，在ADME及代谢物鉴定研究中有应用价值。

• 同位素标记物：利福昔明-d6（CAS 1262992-43-7）为氘代同位素内标，主要用于LC-MS/MS法的生物样品定量分析，在ADME研究及生物等效性检测中发挥关键作用。

三、欧洲药典（EP）收载的八个杂质

欧洲药典（Ph. Eur.）对利福昔明收载了从A到H共八个受控杂质（连续命名，无跳号），分析方法以反相HPLC为核心，检测波长276 nm，以杂质D和杂质H作为系统适用性标志物（两者相对保留时间RRT均约为0.7）。

值得注意的是：杂质A（2-氨基-4-甲基吡啶，MW 108）是小分子合成中间体，与其他七个利福霉素骨架的大分子杂质在色谱行为上差异显著，方法开发时需特别关注检测条件的兼容性。杂质H的结构鉴定曾有过一段学术历史——早年EP版本中的结构标注被发现有误，经Stradi等研究者于2010年通过NMR/MS重新鉴定后得以修正，现行收载结构为16位去甲基化的羟甲基衍生物。

*CATO目前可提供利福昔明EP杂质A至H的完整八品种，其中杂质H（CP107013）和利福霉素S（即EP杂质E，CCAD302181）已有现货供应。所有品种均经过HPLC、NMR、MS等多重表征，COA含不确定度声明（±2.0%，95% CI），符合法规申报要求。CATO是目前国内同时持有CNAS RM0030和ANAB AR-2832双ISO 17034认证的参考物质供应商，可出具双认证范围内的赋值对照品。

四、中国药典（ChP）与EP的命名对应关系：一个必须厘清的误区

许多QC人员在使用国内检验依据时，容易将ChP中的"杂质A"与EP中的"杂质A"混为一谈——这是两套完全独立的命名体系，同名杂质并非同一化合物。

中国药典收载的利福昔明有关物质检查方法采用辛基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲体系为流动相，检测波长240 nm，系统适用性溶液中按杂质A、利福昔明、杂质B的顺序出峰（即ChP杂质A出峰早于主峰，杂质B的相对保留时间约为4）。

而EP的分析方法使用酰胺封端的ODS柱，以甲酸铵-氨水缓冲体系（pH 7.2）搭配乙腈-甲醇混合有机相，检测波长276 nm，系统适用性标志物为杂质D和H（RRT≈0.7，均早于主峰出峰）。

两套方法的色谱系统、流动相、pH值和检测波长均不相同，所对应的"杂质A"自然不是同一化合物。申报文件中如需对两套药典的杂质进行对应说明，应基于各杂质的CAS号或结构式进行归属，不能仅依据字母命名进行对应。

五、一致性评价全套备货清单

对于正在推进或计划推进利福昔明一致性评价的仿制药企业，以下为建议配套的杂质对照品清单，涵盖方法开发、杂质研究、稳定性考察及LC-MS分析等各应用场景：

CATO覆盖上述全部14个品种，其中EP杂质A至H八品种全套可配，现货品种可快速交付，非现货品种可接受订制合成，交期请以最新库存状态为准。

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常见问题解答（FAQ）

Q1：EP杂质D没有公开的CAS号，如何确认采购的对照品结构一致？

A：杂质D目前未见公开登记的CAS号，这在生物合成来源的复杂杂质中并不罕见。评估对照品质量时，应要求供应商提供¹H NMR、¹³C NMR及高分辨质谱（HRMS）等多维度结构表征数据，并对照EP专论中收录的结构式进行比对核实。COA中应包含HPLC纯度（≥95%）和不确定度数据。

Q2：一致性评价是否必须备齐所有EP杂质对照品？

A：需根据实际工艺路线和杂质风险评估结果确定必要范围，并非机械要求全套EP杂质一一备齐。但EP杂质D和H作为方法系统适用性验证的必备标准品，以及与自身工艺相关的杂质对照品，是方法开发和QC放行的基本配置。建议参照ICH Q3A指导原则，结合杂质鉴定和限度要求来确定完整备货方案。

Q3：利福昔明是否存在基因毒杂质（GTI）风险？

A：目前公开文献和法规文件中，尚未见到针对利福昔明或其工艺杂质的ICH M7专项基因毒性关注通报。EP收载的8个杂质中，杂质A（2-氨基-4-甲基吡啶）为含氨基的小分子，从结构预警角度，企业通常会在工艺研究阶段对其进行GTI评估，建议结合（Q)SAR预测工具和文献综述开展评估，以完善风险管控文件。

Q4：利福昔明晶型对一致性评价有何影响？

A：利福昔明存在α、β、γ、δ、ε五种晶型，原研产品采用α晶型，口服吸收率极低（约0.4%），局部肠道给药效果确切。不同晶型的药理学特性差异显著，仿制药研究需确保与原研同为α晶型，这也是该品种一致性评价的关键技术难点之一。

利福昔明杂质谱复杂、对照品种类多，EP与ChP命名体系不兼容，加之晶型研究和相关杂质的系统性覆盖要求，使得全套对照品的配齐难度在国内长期较高。

CATO目前可提供利福昔明EP杂质A至H全套八品种，以及同位素内标、代谢杂质等14个相关品种，产品经HPLC+NMR+MS三重表征，纯度≥95%，COA含不确定度声明，持有CNAS RM0030和ANAB AR-2832双ISO 17034认证，支持申报文件溯源。如需获取具体库存状态、COA样本或定制合成报价，欢迎联系CATO技术服务团队。

参考文献

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[2] Hepatox药物性肝损伤专业网. 利福昔明(Rifaximin)药物信息. http://www.hepatox.org/drug/show/379

[3]百度百科. 利福昔明词条（引用《中国药典》相关内容）. https://baike.baidu.com/item/利福昔明/7063208

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[6] Liu C, Hu CQ, Jin SH. Structure Elucidation of Two Unknown Oxydic Degradation Impurities of Rifaximin. Asian Journal of Chemistry, 2011, 23(7): 3252.

[7]BOC Sciences. Rifaximin EP Impurity A (CAS 695-34-1). https://www.bocsci.com/product/rifaximin-ep-impurity-a-cas-695-34-1-325553.html

[8] BOC Sciences. Rifaximin EP Impurity H (CAS 1210022-90-4). https://www.bocsci.com/product/rifaximin-ep-impurity-h-cas-1210022-90-4-479077.html

[9] BOC Sciences. Rifaximin EP Impurity E / Rifamycin S (CAS 13553-79-2). https://www.bocsci.com/product/rifaximin-ep-impurity-e-cas-13553-79-2-57816.html

[10] 摩熵医药（原药融云）. 盘点三款专利即将到期重磅小分子药：利格列汀片、利福昔明片、达沙替尼片. https://www.pharnexcloud.com/zixun/sd_36251

[11] 摩熵医药（原药融云）. 专利即将到期五大重磅小分子药品，国内仿制药"战况"几何？https://www.pharnexcloud.com/zixun/sd_36253

[12] ICH Q3A(R2). Impurities in New Drug Substances. International Council for Harmonisation, 2006.

[13] ICH M7(R2). Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk. ICH, 2023.